Direkte RT-qPCR Kit
Kitbeskrivelse:
◮ Direct RT-qPCR Kit, ved hjælp af Foreasy Reverse Transcriptase og Foreasy HS Taq DNA Polymerase udviklet af Foregene, med unik reaktionsbuffer, gør dette kit med stærk resistens og kompatibilitet, og det kan direkte teste reaktion ved at bruge Foregene Lysis-system som skabelon.Dette kit kan ansøge om udvikling af nukleinsyredetektionskit for COVID-19 og andre patogene bakterier.
Beskrivelse
Direct RT-qPCR Kit giver separat pakket RT-qPCR buffer og højeffektivt enzymblanding (Taq, M-MLV, RI), hvilket gør det praktisk til oprettelse af back-end kits og systemjustering, inden for simpel verifikation.
specifikationer
500T, 50.000T
Sættets komponenter
| Sættets indhold (20 μL reaktionssystem) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Direkte enzymblanding | 500 μL×1 | 50 ml×1 |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 1 ml× 5 | 500 ml×1 |
| Instruktion | 1 | 1 |
Betjeningstrin
Før reagensforberedelse skal alle reagenser i sættet optøs ved stuetemperatur og blandes forsigtigt.
A: Forberede of skabelon og reagens
1. Forbered forberedt RNA-skabelon (det anbefales at bruge Foregene Total RNA Isolation Kit serie-kit til at ekstrahere og oprense RNA-skabelon) eller prøvekrakningsprodukt (det anbefales at bruge Foregene Lysis-system), specifikke primere (10 μM) og andre relevante forbrugsstoffer, instrument.
2. Sæt 2× Direct RT-qPCR-buffer, RNase-Free ddH2O og 20× ROX Reference Dye (hvis det'er nødvendig) i boksen med is, så disse smelter naturligt og blandes forsigtigt.
B: Forberede of RT-qPCR system
Bord 1 : Forberede of RT-qPCR ssystem
| Komponent | Bind | Slutkoncentration |
| 2× Direkte RT-qPCR-buffer | 10 μL | 1× |
| Direkte enzymblanding | 1μL | |
| Fremadprimer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Probe (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Skabelon (RNA eller lysat) | X μL | |
| 20×ROX referencefarve | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6,4-X) μL | |
| Samlet volumen | 20μL |
C: Sæt det RT-qPCR reaktion program
Bord 2 : RT-qPCR reagereon program indstilling (til eksempel: to-trin metode)
| Trin | Temperatur | Tid | Cykler | Indhold | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Omvendt transskription |
| 2 | 95℃ | 1 min | 1 | Præ-denaturering | |
| 3 | 95℃ | 10 sek | 40-45 | Denaturering | |
| 60℃ | 30 sek 2* | Udglødning/udvidelse | |||
Opbevaring og holdbarhed
-Sættet skal opbevares ved -20± 5℃.Gyldighedsperioden er 12 måneder.
-Undgå gentagne fryse-tø-cyklusser (<5 cyklusser).
