ForeDirect RT-qPCR Kit
Kitbeskrivelse:
◮Til RNA direkte amplifikation i realtid fra podepindesamlinger uden RNA-oprensningsprocesser.Dette sæt fuldfører qRT-PCR-cyklusserne inden for en time.Enzymblandingen er en optimeret blanding af omvendt transkriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-hæmmer.Reaktionsbufferen indeholder alle de nødvendige komponenter, inklusive optimerede bufferkomponenter, Mg2+, dUTP og dNTP'er.
Beskrivelse
ForeDirect RT-qPCR Kit er designet til RNA-direkte realtidsamplifikation fra podningsprøver uden RNA-oprensningsprocesser.Dette sæt fuldfører qRT-PCR-cyklusserne inden for en time.Enzymblandingen er en optimeret blanding af omvendt transkriptase, Hot-Start Taq DNA-polymerase, RNase-hæmmer.Reaktionsbufferen indeholder alle de nødvendige komponenter, inklusive optimerede bufferkomponenter, Mg2+, dUTP og dNTP'er.
specifikationer
100T
Sættets komponenter
| Nukleinsyrefrigivelsesmiddel |
| RNA-beskyttende |
| 2× RT-qPCR-buffer |
| Enzymblanding (Taq&M-MLV) |
| Instruktioner |
PCR-applikation
1. Når PCR-reaktionsrørene er blevet kortvarigt centrifugeret, placeres dem i prøvetanken på amplifikationsinstrumentet.
2. Termisk protokol
| Trin | Temperatur | Tid | Cykler | |
| 1 | Omvendt transskription | 50 ℃ | 15 min | 1 |
| 2 | Præ-denaturering | 95℃ | 1 min | 1 |
| 3 | Denaturering | 95℃ | 10 sekunder | 42 |
| 4 | Udglødning/udvidelse | 60℃ | 30 sekunder | |
Bemærk:Fluorescerende signal blev detekteret umiddelbart efter forlængelsestrinnet i hver cyklus.
3. Efter indstilling, gem filen og kør reaktionsprogrammet.
Betjeningstrin
Før reagensforberedelse skal alle reagenser i sættet optøs ved stuetemperatur og blandes forsigtigt.
Reagensforberedelse
1. Forbered nukleinsyrefrigivelsesblandingen
| Komponent | Lydstyrke pr. prøve eller kontrol |
| Nukleinsyrefrigivelsesmiddel | 5 μL |
| RNA-beskyttende | 0,5 μL |
2. Forbered reaktionsblandingen
| Komponent | Lydstyrke pr. prøve eller kontrol |
| 2× RT-qPCR-buffer | 15 μL |
| Enzymblanding (Taq&M-MLV) | 1,5 μL |
| Primere og sonder | 1 μL |
Opbevaring og holdbarhed
-Sættet skal opbevares ved -20± 5℃.Gyldighedsperioden er 12 måneder.
-Undgå gentagne fryse-tø-cyklusser (<5 cyklusser).
