• facebook
  • linkedin
  • Youtube
side_banner

Foreasy Taq DNA-polymerase

Kitbeskrivelse:

Høj specificitet: Enzymet har en vis hot-start aktivitet.

Hurtig forstærkning: 10 sek/kb.

Meget tilpasningsdygtig skabelon: kan bruges til effektivt at amplificere GC Høj værdi, forskellige DNA-skabeloner, der er svære at amplificere.

Stærk troskab: almindeligt Taq Enzyme 6 gange.

Stærk termisk stabilitet: Den kan placeres ved 37 °C i en uge og opretholder mere end 90 % aktivitet.

forudgående styrke


Produktdetaljer

Produkt Tags

FAQ

Beskrivelse

Foreasy Taq DNA Polymerase er et nyt Taq-enzym udtrykt i Escherichia coli-teknologiske bakterier ved genrekombinationsteknologi.Enzymet i sig selv har en vis hot-start aktivitet og kan bruges til konventionel PCR og qPCR;den har 5'→3' DNA-polymeraseaktivitet og 5'→3' exonukleaseaktivitet, men ingen 3'→5' exonukleaseaktivitet.

Sættets komponenter

Komponent

IM-01011 IM-01012 IM-01013
Foreasy Taq DNA-polymerase(5 U/μL)  5000 U (1 ml)  50 KU (10 ml)  500 KU (100 ml)
2× Taq-reaktionsbuffer  25 ml × 5  250 ml × 5  500 ml x 25

Egenskaber og fordele

- Høj specificitet: Enzymet har en vis hot-start aktivitet.

- Hurtig forstærkning: 10 sek/kb.

- Meget tilpasningsdygtig skabelon: kan bruges til effektivt at amplificere GC High-værdi, forskellige DNA-skabeloner, der er svære at amplificere.

- Stærk troskab: almindeligt Taq Enzyme 6 gange.

- Stærk termisk stabilitet: Den kan placeres ved 37 °C i en uge og opretholder mere end 90% aktivitet

Kit ansøgning

Forskellige PCR/qPCR-systemer og direkte PCR-systemer

PCR-amplifikation af DNA-fragmenter

DNA-mærkning

DNA-sekventering

PCR A-hale

U Definition

1U: Mængden af ​​enzym, der kræves for at inkorporere 10 nmol deoxynukleotider i syre-uopløseligt materiale under anvendelse af aktiveret laksesperm-DNA som skabelon/primer i 30 minutter ved 74°C.

Reaktionstilstand

Temperatur Tid Cyklus
37°C 5 min 1
94°C 5 min 1
94°C 10 sek  

35

60°C 10 sek
72°C 20 sek/kb
72°C 2 min 1

Opbevaring

-20 ± 5 °C i 2 år eller ved -80 °C til langtidsopbevaring.


  • Tidligere:
  • Næste:

  • Ingen forstærkningssignaler

    1. Taq DNA-polymerasen i sættet mister sin aktivitet på grund af forkert opbevaring eller udløb af sættet.
    Anbefaling: Bekræft opbevaringsbetingelserne for sættet;gentilføj en passende mængde Taq DNA-polymerase til PCR-systemet eller køb et nyt Real Time PCR-kit til relaterede eksperimenter.

    2.Der er en masse hæmmere af Taq DNA-polymerase i DNA-skabelonen.
    Forslag: Rens skabelonen igen, eller reducer mængden af ​​anvendt skabelon.

    3.Mg2+-koncentrationen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ koncentrationen af ​​den 2× Real PCR Mix, vi leverer, er 3,5 mM.For nogle specielle primere og skabeloner kan Mg2+-koncentrationen dog være højere.Derfor kan du direkte tilføje MgCl2 for at optimere Mg2+ koncentrationen.Det anbefales at øge Mg2+ 0,5mM hver gang for optimering.

    4. PCR-amplifikationsbetingelserne er ikke egnede, og primersekvensen eller koncentrationen er forkert.
    Forslag: bekræft rigtigheden af ​​primersekvensen, og primeren er ikke blevet nedbrudt;hvis forstærkningssignalet ikke er godt, prøv at sænke annealingstemperaturen og juster primerkoncentrationen korrekt.

    5. Mængden af ​​skabelon er for lidt eller for meget.
    Anbefaling: Udfør skabelonlineariseringsgradientfortynding, og vælg skabelonkoncentrationen med den bedste PCR-effekt til Real Time PCR-eksperiment.

    NTC har for høj fluorescensværdi

    1.Reagenskontamination forårsaget under drift.
    Anbefaling: Udskift med nye reagenser til Real Time PCR-eksperimenter.

    2. Kontaminering fandt sted under fremstillingen af ​​PCR-reaktionssystemet.
    Anbefaling: Træf nødvendige beskyttelsesforanstaltninger under driften, såsom: at bære latexhandsker, bruge en pipettespids med et filter osv.

    3. Primerne nedbrydes, og nedbrydningen af ​​primerne vil forårsage uspecifik amplifikation.
    Forslag: Brug SDS-PAGE-elektroforese til at detektere, om primerne er nedbrudt, og udskift dem med nye primere til realtids-PCR-eksperimenter.

    Primer dimer eller ikke-specifik amplifikation

    1.Mg2+-koncentrationen er ikke egnet.
    Anbefaling: Mg2+ koncentrationen af ​​den 2× Real PCR EasyTM Mix, vi leverer, er 3,5 mM.For nogle specielle primere og skabeloner kan Mg2+-koncentrationen dog være højere.Derfor kan du direkte tilføje MgCl2 for at optimere Mg2+ koncentrationen.Det anbefales at øge Mg2+ 0,5mM hver gang for optimering.

    2. PCR-udglødningstemperaturen er for lav.
    Forslag: Forøg PCR-udglødningstemperaturen med 1 ℃ eller 2 ℃ hver gang.

    3. PCR-produktet er for langt.
    Anbefaling: Længden af ​​Real Time PCR-produktet bør være mellem 100-150bp, ikke mere end 500bp.

    4. Primerne nedbrydes, og nedbrydningen af ​​primerne vil føre til fremkomsten af ​​specifik amplifikation.
    Forslag: Brug SDS-PAGE-elektroforese til at detektere, om primerne er nedbrudt, og udskift dem med nye primere til realtids-PCR-eksperimenter.

    5.PCR-systemet er forkert, eller systemet er for lille.
    Forslag: PCR-reaktionssystemet er for lille vil medføre, at detektionsnøjagtigheden falder.Det er bedst at bruge det reaktionssystem, der anbefales af det kvantitative PCR-instrument til at køre Real Time PCR-eksperimentet igen.

    Dårlig repeterbarhed af kvantitative værdier

    1. Instrumentet fungerer ikke.
    Forslag: Der kan være fejl mellem hvert PCR-hul i instrumentet, hvilket resulterer i dårlig reproducerbarhed under temperaturstyring eller detektion.Kontroller venligst i henhold til instruktionerne for det tilsvarende instrument.

    2. Prøvens renhed er ikke god.
    Anbefaling: Urene prøver vil føre til dårlig reproducerbarhed af eksperimentet, hvilket inkluderer renheden af ​​skabelonen og primerne.Det er bedst at genrense skabelonen, og primerne renses bedst ved SDS-PAGE.

    3. PCR-systemets forberedelses- og lagringstid er for lang.
    Forslag: Brug Real Time PCR-systemet til PCR-eksperiment umiddelbart efter forberedelse, og lad det ikke ligge for længe.

    4. PCR-amplifikationsbetingelserne er ikke egnede, og primersekvensen eller koncentrationen er forkert.
    Forslag: bekræft rigtigheden af ​​primersekvensen, og primeren er ikke blevet nedbrudt;hvis forstærkningssignalet ikke er godt, prøv at sænke annealingstemperaturen og juster primerkoncentrationen korrekt.

    5.PCR-systemet er forkert, eller systemet er for lille.
    Forslag: PCR-reaktionssystemet er for lille vil medføre, at detektionsnøjagtigheden falder.Det er bedst at bruge det reaktionssystem, der anbefales af det kvantitative PCR-instrument til at køre Real Time PCR-eksperimentet igen.

    Skriv din besked her og send den til os