Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (uden prøvetagningsværktøjer) protokol
Beskrivelser
Dette kit bruger et unikt lyseringsbuffersystem til hurtigt at frigive genomisk DNA fra dyrevævsprøver til PCR-reaktioner, så det er særligt velegnet til genetisk testning i stor skala.
Processen med at frigive genomisk DNA fra lysisbufferen afsluttes inden for 10-30 minutter ved 65°C.Ingen andre processer såsom protein- og RNA-fjernelse er påkrævet, og det frigivne spor-DNA kan bruges som skabelon til PCR-reaktion.
2×PCR nemtTMMix (UNG) bruger dUTP i stedet for dTTP på basis af 2×PCR EasyTMBland og tilsæt UNG-enzym (Uracil-N-glycosylase), der kan nedbryde skabelonen indeholdende dUTP på samme tid.Før PCR-reaktionen bruges UNG-enzymet til at nedbryde PCR-produktet indeholdende uracil.UNG-enzymet vil ikke have nogen effekt på skabelonen, der ikke indeholder uracil, hvilket sikrer specificiteten og nøjagtigheden af amplifikationen og forhindrer muligheden for PCR-produkter kontaminering under storstilet genetisk testning.
D-Taq DNA-polymerase er en DNA-polymerase, der er specielt udviklet af Foregene til direkte PCR-reaktioner.D-Taq DNA-polymerase har stærk tolerance over for en række PCR-reaktionshæmmere og kan effektivt amplificere spormængder af DNA i forskellige komplekse reaktionssystemer, og amplifikationshastigheden kan nå 2Kb/min, hvilket er særligt velegnet til direkte PCR-reaktion.
Sættets komponenter
Del I | Buffer AL |
Foregene Protease | |
6× DNA-indlæsningsbuffer | |
Del II | 2×PCR nemtTMMix (UNG) |
Egenskaber og fordele
■Ingen tidskrævende og dyr DNA-oprensning
■ Prøvebehovet er lille, så lidt som 5 mg dyrevæv kan testes.
■ Der kræves ingen særlig behandling såsom slibning og knusning, og betjeningen er enkel.
■ Optimeret PCR-system gør, at PCR har højere specificitet og stærkere tolerance over for PCR-reaktionshæmmere.
■ Anti-forurening PCR-system 2×PCR nemtTMMix (UNG) eliminerer effektivt forureningen forårsaget af PCR-produkter og sikrer specificiteten og nøjagtigheden af amplifikation.
Sættets parametre
Anvendelse: en række dyrevæv.
DNA frigivet fra prøvelysis: bruges kun som en PCR-skabelon.
Sættet kan bruges til følgende formål: identifikation af transgenose, dyregenotypning mv.
Workflow
Opbevaring og holdbarhed
Del I af dette sæt skal opbevares ved 2-8℃.
Reagensbuffer AL kan opbevares i 12 måneder under tørre forhold;den kan opbevares ved 2-8℃til længere opbevaring.
Reagens Foregene Protease har en unik formel.For at sikre dens aktivitet og stabilitet skal du opbevare den på 4℃i 12 måneder.
Reagens 6×DNA Loading Buffer kan opbevares ved 4℃eller -20℃i lang tid.
Del II af dette sæt skal opbevares ved -20℃.
Reagens 2×PCR nemtTMBland(UNG), hvis det bruges ofte, kan det også opbevares ved 4℃til korttidsopbevaring (brug op inden for 10 dage).