Vi tilbyder vidunderlig energi i høj kvalitet og forbedring, merchandising, produktsalg og markedsføring og reklame og procedure for producent for Single Strip Mag-Rod Comb Nucleic Acid Test Detection Disposable Consumables, Vores virksomhed insisterer på innovation for at fremme en bæredygtig udvikling af virksomheden og få os til at blive de indenlandske højkvalitetsleverandører.
Vi tilbyder vidunderlig energi i høj kvalitet og forbedring, merchandising, produktsalg og markedsføring og reklame og procedure forKina nukleinsyre og medicinske forbrugsvarer, Over for hård global markedskonkurrence har vi lanceret brandbuildingsstrategien og opdateret ånden af ​​"menneskeorienteret og trofast service", med det formål at opnå global anerkendelse og bæredygtig udvikling.

Kitbeskrivelser

2X Real PCR Easy^TMMix-Taqman leveret af Real Time PCR Easy^TM-Taqman kit er et nyt premix-system, der bruger specifikke fluorescerende prober til Real Time PCR-amplifikationsreaktioner, hvilket i høj grad kan forbedre produktspecificiteten og reaktionsfølsomheden.ROX leveres som intern kontrolfarve.

2X Real PCR Nem^TMMix-Taqman indeholder Foregenes unikke hot-start Taq DNA Polymerase.Sammenlignet med almindelige Taq-enzymer har det fordelene ved høj amplifikationseffektivitet, stærk specifik amplifikationsevne og lav mismatch-rate.Det kan reducere uspecifik amplifikation og forbedre nøjagtigheden af ​​PCR.

specifikationer

Egenskaber og fordele

■ Simple—2X PCR Mix for at reducere eksperimentel fejl og driftstid

■ Specifik – optimeret buffer og hot-start Taq enzym kan forhindre uspecifik amplifikation og primer dimer dannelse

■ Høj følsomhed – kan registrere lave kopier af skabelonen

■ God alsidighed – kompatibel med de fleste kvantitative realtids-PCR-instrumenter

Kit ansøgning

qPCR-analyse

Workflow

Grafisk

Opbevaring og holdbarhed

Dette sæt skal opbevares væk fra lys og skal opbevares ved -20 ℃.Hvis den bruges ofte, kan den også opbevares ved 4 ℃ i en kort periode (10 dage).

Vi tilbyder vidunderlig energi i høj kvalitet og forbedring, merchandising, produktsalg og markedsføring og reklame og procedure for producent for Single Strip Mag-Rod Comb Nucleic Acid Test Detection Disposable Consumables, Vores virksomhed insisterer på innovation for at fremme en bæredygtig udvikling af virksomheden og få os til at blive de indenlandske højkvalitetsleverandører.
Producent forKina nukleinsyre og medicinske forbrugsvarer, Over for hård global markedskonkurrence har vi lanceret brandbuildingsstrategien og opdateret ånden af ​​"menneskeorienteret og trofast service", med det formål at opnå global anerkendelse og bæredygtig udvikling.

Ingen forstærkningssignaler

1. Taq DNA-polymerasen i sættet mister sin aktivitet på grund af forkert opbevaring eller udløb af sættet.
Anbefaling: Bekræft opbevaringsbetingelserne for sættet;gentilføj en passende mængde Taq DNA-polymerase til PCR-systemet eller køb et nyt Real Time PCR-kit til relaterede eksperimenter.

2.Der er en masse hæmmere af Taq DNA-polymerase i DNA-skabelonen.
Forslag: Rens skabelonen igen, eller reducer mængden af ​​anvendt skabelon.

3.Mg2+-koncentrationen er ikke egnet.
Anbefaling: Mg2+ koncentrationen af ​​den 2× Real PCR Mix, vi leverer, er 3,5 mM.For nogle specielle primere og skabeloner kan Mg2+-koncentrationen dog være højere.Derfor kan du direkte tilføje MgCl2 for at optimere Mg2+ koncentrationen.Det anbefales at øge Mg2+ 0,5mM hver gang for optimering.

4. PCR-amplifikationsbetingelserne er ikke egnede, og primersekvensen eller koncentrationen er forkert.
Forslag: bekræft rigtigheden af ​​primersekvensen, og primeren er ikke blevet nedbrudt;hvis forstærkningssignalet ikke er godt, prøv at sænke annealingstemperaturen og juster primerkoncentrationen korrekt.

5. Mængden af ​​skabelon er for lidt eller for meget.
Anbefaling: Udfør skabelonlineariseringsgradientfortynding, og vælg skabelonkoncentrationen med den bedste PCR-effekt til Real Time PCR-eksperiment.

NTC har for høj fluorescensværdi

1.Reagenskontamination forårsaget under drift.
Anbefaling: Udskift med nye reagenser til Real Time PCR-eksperimenter.

2. Kontaminering fandt sted under fremstillingen af ​​PCR-reaktionssystemet.
Anbefaling: Træf nødvendige beskyttelsesforanstaltninger under driften, såsom: at bære latexhandsker, bruge en pipettespids med et filter osv.

3. Primerne nedbrydes, og nedbrydningen af ​​primerne vil forårsage uspecifik amplifikation.
Forslag: Brug SDS-PAGE-elektroforese til at detektere, om primerne er nedbrudt, og udskift dem med nye primere til realtids-PCR-eksperimenter.

Primer dimer eller ikke-specifik amplifikation

1.Mg2+-koncentrationen er ikke egnet.
Anbefaling: Mg2+ koncentrationen af ​​den 2× Real PCR EasyTM Mix, vi leverer, er 3,5 mM.For nogle specielle primere og skabeloner kan Mg2+-koncentrationen dog være højere.Derfor kan du direkte tilføje MgCl2 for at optimere Mg2+ koncentrationen.Det anbefales at øge Mg2+ 0,5mM hver gang for optimering.

2. PCR-udglødningstemperaturen er for lav.
Forslag: Forøg PCR-udglødningstemperaturen med 1 ℃ eller 2 ℃ hver gang.

3. PCR-produktet er for langt.
Anbefaling: Længden af ​​Real Time PCR-produktet bør være mellem 100-150bp, ikke mere end 500bp.

4. Primerne nedbrydes, og nedbrydningen af ​​primerne vil føre til fremkomsten af ​​specifik amplifikation.
Forslag: Brug SDS-PAGE-elektroforese til at detektere, om primerne er nedbrudt, og udskift dem med nye primere til realtids-PCR-eksperimenter.

5.PCR-systemet er forkert, eller systemet er for lille.
Forslag: PCR-reaktionssystemet er for lille vil medføre, at detektionsnøjagtigheden falder.Det er bedst at bruge det reaktionssystem, der anbefales af det kvantitative PCR-instrument til at køre Real Time PCR-eksperimentet igen.

Dårlig repeterbarhed af kvantitative værdier

1. Instrumentet fungerer ikke.
Forslag: Der kan være fejl mellem hvert PCR-hul i instrumentet, hvilket resulterer i dårlig reproducerbarhed under temperaturstyring eller detektion.Kontroller venligst i henhold til instruktionerne for det tilsvarende instrument.

2. Prøvens renhed er ikke god.
Anbefaling: Urene prøver vil føre til dårlig reproducerbarhed af eksperimentet, hvilket inkluderer renheden af ​​skabelonen og primerne.Det er bedst at genrense skabelonen, og primerne renses bedst ved SDS-PAGE.

3. PCR-systemets forberedelses- og lagringstid er for lang.
Forslag: Brug Real Time PCR-systemet til PCR-eksperiment umiddelbart efter forberedelse, og lad det ikke ligge for længe.

4. PCR-amplifikationsbetingelserne er ikke egnede, og primersekvensen eller koncentrationen er forkert.
Forslag: bekræft rigtigheden af ​​primersekvensen, og primeren er ikke blevet nedbrudt;hvis forstærkningssignalet ikke er godt, prøv at sænke annealingstemperaturen og juster primerkoncentrationen korrekt.

5.PCR-systemet er forkert, eller systemet er for lille.
Forslag: PCR-reaktionssystemet er for lille vil medføre, at detektionsnøjagtigheden falder.Det er bedst at bruge det reaktionssystem, der anbefales af det kvantitative PCR-instrument til at køre Real Time PCR-eksperimentet igen.