Introduktion:

RNA-molekyler kan interagere i udstrakt grad med andre biologiske molekyler, såsom protein, DNA og RNA, og eksisterer således i celler og organismer i form af makromolekylære komplekser.Blandt dem er RNA-proteinkomplekser eksistensen og funktionen af ​​RNA En af de vigtige former for.RNA pull-down er en klassisk metode til screening og identifikation af RNA-molekyler, især de interagerende proteiner i lncRNA-molekyler, og er anerkendt af flertallet af forskere og internationale autoritative akademiske tidsskrifter.I dag vil FORREGENE dele det eksperimentelle princip og den tekniske proces med RNA pull-down med dig, måske du kan bruge det

1. Det eksperimentelle princip for RNA pull down-teknologi:

In vitro transkription og syntese af biotin-mærkede mål-lncRNA- eller lncRNA-fragmenter (herunder RNA-fragmenter brugt som positive og negative kontroller), og inkuber med celleekstrakter;brug avidin-forankrede magnetiske perler til at opsamle RNA-protein eller RNA-RNA komplekser. Efter grundig vask elueres komplekset.Hvis du påviser proteinmålmolekylet, der interagerer med lncRNA, skal du udføre proteinelektroforese på RNA-pull-down-produktet, påvise målproteinet ved sølvfarvning og skære gelen til massespektrometri;også direkte udføre western blot-verifikation på pull-down-produktet;hvis det påvises For RNA-målmolekyler, der interagerer med lncRNA, udsættes RNA-pull-down-produkter for RNA-ekstraktion, og der udføres specifik qRT-PCR-detektion.

2. RNA pull down teknologi eksperiment proces:

3. Teknisk service for RNA-pulldown af FOREGENE:

Cellekultur

Fremstilling af celletotal/nuklear/plasmaproteinekstrakt

RNA pull down eksperiment

SDS-PAGE elektroforese, sølvfarve

Massespektrometri og WB eksperimenter

Eksperimentel rapport

4. Eksperimentel case

Følgende figur viser resultaterne af FJ Bio-Bios RNA pull down og SDS-PAGE elektroforesedetektion, hvor den røde pil markerer forskelsbåndet:

Forskergruppen af ​​professor Song Xu fra Sichuan University har akkumuleret 15 års langsigtet akkumulering inden for lncRNA-forskning.Foregene Bio og professor Song Xus forskningsgruppe samarbejdede om at lancere RNA pull down teknologien af ​​lncRNA, som vil give dig et tilfredsstillende resultat for dit eksperiment.