Introduktion:

RNA, videnskabeligt navn ribonukleinsyre, dets forkortelse kommer fra RiboNukleinsyre, er en type nukleinsyre dannet ved at forbinde mindst snesevis af ribonukleotider gennem phosphodiesterbindinger.

Udgangspunktet for at udforske RNA er at udvinde forureningsfrit Total RNA, og det grundlæggende princip for RNA-ekstraktion kan groft opsummeres som følger:

1. Forstyr først cellerne

2. Fjern derefter makromolekylære urenheder (proteiner, lipider, DNA osv.)

3. Til sidst udfældes RNA'et, mens salte og organiske opløsningsmidler fjernes, og RNA'et renses yderligere.

Fortid og nutid af ekstraktionsmetode

Den første generation af RNA-ekstraktionsmetoden er TRIzol-udfældningsmetoden (reagenser, der anvendes inkluderer guanidinisothiocyanat, phenol, chloroform osv.) opfundet af en bedstefar ved navn Piotr Chomczynski og bedstemor Nicoletta Sacchi, fordi denne opfindelse tillader RNA-ekstraktion Hurtigt og nemt, siden da startede RNA-forskningen.

Senere solgte bedstefar dette patent til Invitrogen, og Invitrogen promoverede denne metode til verden og blev en meget brugt metode.

Senere blev Invitrogen opkøbt af Thermo!

Repræsentativt produkt: Invitrogens TRIzol-reagens

TRIzol-fældningsmetoden kræver dog flere udfældninger og ekstraktion af RNA, og de anvendte reagenser er giftige og tager lang tid at fungere.

Derfor opstod andengenerations kolonne-enzymoprensningsmetoden ved at bruge silicagelmembran som et specifikt nukleinsyreadsorptionsmateriale for at maksimere genvindingen af ​​RNA i prøven, mens andre urenheder fjernes.

Andengenerationsmetoden forenkler operationen på basis af stabil ydeevne, reducerer risikofaktoren og forbedrer effektiviteten af ​​RNA-ekstraktion.

Repræsentative produkter: QIAGEN RNeasy og de fleste indenlandske produkter

Imidlertid kræver både første- og andengenerationsmetoden brugen af ​​DNase til at fjerne DNA-kontamination, hvilket medfører en vis ulempe for efterfølgende downstream-eksperimenter.Resterende DNase vil reducere effektiviteten af ​​revers transkription og reducere den første-strengs cDNA-syntese og derved påvirke nøjagtigheden af ​​resultaterne.

Derfor er tredje generations udvindingsmetode optimeret på basis af anden generation.Forsøget behøver ikke at tilføje nogen enzymer, og RNA kan nemt opnås med kun to kolonner.

Kolonne 1: DNA-rensningssøjle for at rense DNA

Kolonne 2: Kun RNA-kolonne adsorberer og genvinder specifikt RNA

En sådan simpel operation sparer ikke kun tid, men letter også driften af ​​downstream-eksperimenter!

Repræsentative produkter: QIAGEN RNeasy Plus ogForegeneRNA rensning serie produkter

（RNeasy Plus）

(ForegenesPlant Total RNA Isolation Kit）

Fortæl det stille og roligt!Foregenes RNA-kit præsenterer også en super nem at bruge RNase Eraser, som helt kan fjerne 400μg RNase på den faste overflade på 1 minut, uden at tilføre nogen giftige stoffer til den menneskelige krop!

Billede1: Operationel proces sammenligning diagram

Foregenes produkter kan fuldføre RNA-ekstraktion på kun to sange, gør ikke andre jaloux på dit eksperimentfremskridt!

Billede2:Eeksperimentelle resultater sammenligningsdiagram

Den første generation (1: TRIzol)

Anden generation (2: RNeasy of QIAGEN)

Den tredje generation (3: QIAGENs RNeasy plus, 4: Foregene)

Billede3: qPCR-graf (amplifikationskurvegraf)

Den første generation (grøn betyder TRIzol -, rød betyder TRIzol +)

Anden generation (himmelblå betyder QIAGEN RNeasy-, rød betyder QIAGEN RNeasy +)

Den tredje generation (blå betyder QIAGEN RNeasy plus, grøn betyder Foregene)

(Bemærk: qPCR-graf "-" angiver, at DNase ikke er blevet tilføjet, og DNA-kontamination ikke er blevet fjernet. Derfor er CT højere, og resultatet er ikke nøjagtigt; "+" angiver, at DNase er blevet tilføjet, og DNA-kontaminationen er blevet fjernet, resultatet er nøjagtigt)

Hver teknisk opgradering betyder, at driften af ​​eksperimentet udvikler sig i en enklere og mere brugervenlig retning.

Foregene sigter mod at hjælpe flere videnskabelige forskere med at spare eksperimentel tid og omkostninger, opnå eksperimentelle resultater af høj kvalitet og i fællesskab skabe mere værdifulde videnskabelige forskningsresultater.