Viralt DNA & RNA isoleringskit Viralt DNA og RNA-ekstraktionsoprensningsforberedelseskit
specifikationer
50 forberedelser, 200 forberedelser
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit bruger spin-søjlen og formelen udviklet af Foregene, som effektivt kan ekstrahere viralt RNA af høj renhed og høj kvalitet fra prøver såsom plasma, serum, cellefri kropsvæske og cellekultursupernatant.Sættet tilføjer specifikt Lineær Acrylamid, som nemt kan fange små mængder RNA fra prøverne.RNA-Only Column kan effektivt binde RNA.Sættet kan behandle et stort antal prøver på samme tid.
Hele kittet indeholder ikke RNase, så det oprensede RNA vil ikke blive nedbrudt.Buffer viRW1 og Buffer viRW2 kan sikre, at den opnåede virale nukleinsyre er fri for protein, nuklease eller andre urenheder, som kan bruges direkte til nedstrøms molekylærbiologiske eksperimenter.
Sættets komponenter
| Lineær acrylamid |
| Buffer DRL |
| Buffer RW1, Buffer RW2 |
| RNase-fri ddH2O |
| DNA/RNA kolonne |
| Instruktioner |
Egenskaber og fordele
■ Drift ved stuetemperatur (15-25℃) gennem hele processen uden isbad og lavtemperaturcentrifugering.
■ Komplet sæt RNase-fri, ingen grund til at bekymre sig om RNA-nedbrydning.
■ Højt nukleinsyreudbytte: Kun DNA/RNA Kolonne og unik formel kan effektivt oprense DNA og RNA.
■ Stor prøvebehandlingskapacitet: op til 200 μl prøver kan behandles hver gang.
■ Hurtig hastighed: nem at betjene og kan gennemføres inden for 20 minutter.
■ Sikkerhed: der kræves ingen organisk reagens.
■ Høj kvalitet: De oprensede RNA-fragmenter er af høj renhed, fri for protein og andre urenheder og kan opfylde forskellige nedstrøms eksperimentelle applikationer.
Kit ansøgning
Den er velegnet til ekstraktion og oprensning af viral nukleinsyre i prøver som plasma, serum, cellefri kropsvæske og cellekultursupernatant.
Workflow
Diagram
Opbevaring og holdbarhed
■ Dette sæt kan opbevares i 24 måneder under tørre forhold ved stuetemperatur (15-25 ℃);hvis det skal opbevares i længere tid, kan det opbevares i 2–8℃.
■ Lineær acrylamidopløsning kan opbevares ved stuetemperatur i 7 dage;efter at du har modtaget sættet, skal du tage det ud og opbevare det ved -20°C.
■ Efter tilsætning af lineær acrylamid til buffer DRL kan den opbevares ved 2-8°C i op til 48 timer.Brug venligst den færdige løsning.
Vejledning til problemanalyse
Det følgende er en analyse af de problemer, der kan opstå ved ekstraktion af viralt DNA/RNA, i håb om at være nyttig for dine eksperimenter.Derudover har vi dedikeret teknisk support til at hjælpe dig til andre eksperimentelle eller tekniske problemer end betjeningsinstruktioner og problemanalyse.Hvis du har behov, så kontakt os venligst: 028-83360257 eller E-mail:
Tech@foregene.com.
Ingen nukleinsyreekstraktion eller lavt nukleinsyreudbytte
Der er normalt mange faktorer, der påvirker genvindingseffektiviteten, såsom: prøvenukleinsyreindhold, operationsmetode, elueringsvolumen osv.
Analyse af almindelige årsager:
1. Et isbad eller lav temperatur (4°C) centrifugering blev udført under proceduren.
Forslag: Kør ved stuetemperatur (15-25°C) gennem hele processen, undlad at isbade og centrifugere ved lav temperatur.
2. Prøven blev opbevaret forkert, eller prøven blev opbevaret for længe.
Anbefaling: Opbevar prøver ved -80°C og undgå gentagen frysning og optøning;prøv at bruge frisk indsamlede prøver til nukleinsyreekstraktion.
3. Utilstrækkelig prøvelysering.
Anbefaling: Sørg for, at prøven og lyseringsarbejdsopløsningen blandes grundigt og inkuberes ved stuetemperatur (15-25°C) i 10 minutter.
4. Forkert tilsætning af eluent.
Forslag: Sørg for, at RNase-Free ddH2O tilsættes dråbevis til midten af rensekolonnens membran, og tab det ikke på rensekolonnens ring.
5. Det korrekte volumen af absolut ethanol blev ikke tilsat til buffer RW2.
Forslag: Følg instruktionerne, tilsæt den korrekte mængde absolut ethanol til buffer RW2 og bland godt, før sættet tages i brug.
6. Upassende prøvevolumen.
Forslag: 200 µl prøve behandles for hver 500 µl buffer DRL.Overdreven prøvebehandling vil resultere i lavere nukleinsyreekstraktionsudbytte.
7. Uhensigtsmæssig elueringsvolumen eller ufuldstændig eluering.
Anbefaling: Rensningskolonnens eluentvolumen er 30-50μl;hvis elueringseffekten ikke er tilfredsstillende, anbefales det at forlænge tiden ved stuetemperatur efter tilsætning af forvarmet RNase-fri ddH2O, såsom 5-10min.
8. Ethanol forbliver på søjlen efter vask med buffer RW2.
Forslag: Hvis der er ethanol tilbage efter centrifugering med buffer RW2 i 2 minutter, kan kolonnen placeres ved stuetemperatur i 5 minutter efter centrifugering for fuldstændigt at fjerne resterende ethanol.
Den oprensede nukleinsyre nedbrydes
Kvaliteten af den rensede nukleinsyre er relateret til bevarelsen af prøven, RNase-kontamination, drift og andre faktorer.Analyse af almindelige årsager:
1. De indsamlede prøver blev ikke opbevaret i tide.
Forslag: Hvis prøven ikke bruges i tide efter indsamling, bedes den straks opbevares ved -80°C ved lav temperatur.For RNA-ekstraktion, prøv at bruge frisk indsamlede prøver.
2. Saml prøver og frys og optø gentagne gange.
Forslag: Undgå frysning og optøning (ikke mere end én gang) under indsamling og opbevaring af prøver, ellers vil nukleinsyreudbyttet blive reduceret.
3. RNase indføres i operationsstuen eller engangshandsker, masker osv. bæres ikke.
Anbefaling: RNA-ekstraktionsforsøg udføres bedst i et separat RNA-operationsrum, og laboratoriebordet bør rengøres før forsøget.
Bær engangshandsker og -masker under forsøget for i størst muligt omfang at undgå RNA-nedbrydning forårsaget af introduktion af RNase.
4. Reagenset var kontamineret med RNase under brug.
Anbefaling: Udskift med et nyt viralt DNA/RNA-isoleringskit til relaterede eksperimenter.
5. Centrifugerørene og pipettespidserne, der bruges til RNA-manipulation, er kontamineret med RNase.
Forslag: Sørg for, at de centrifugerør, pipettespidser, pipetter osv., der bruges til RNA-ekstraktion, alle er RNase-frie.
Oprenset nukleinsyre påvirker nedstrøms eksperimenter
DNA og RNA oprenset af oprensningssøjlen, hvis saltion- og proteinindholdet er for højt, vil det påvirke downstream-forsøgene, såsom: PCR-amplifikation, revers transkription mv.
1. Det eluerede DNA og RNA har resterende saltioner.
Forslag: Sørg for, at den korrekte mængde absolut ethanol tilsættes til buffer RW2, og vask rensekolonnen to gange ved den centrifugeringshastighed, der er angivet i betjeningsvejledningen;Udfør centrifugering for at minimere saltionkontamination.
2. Det eluerede DNA og RNA har ethanolrester.
Forslag: Efter at have bekræftet vaskningen med Buffer RW2, udfør tomme rørcentrifugering ved centrifugeringshastigheden i betjeningsvejledningen;hvis der stadig er ethanolrester, kan du centrifugere det tomme rør og derefter placere det ved stuetemperatur i 5 minutter for at fjerne ethanolresterne i størst muligt omfang.
Instruktionsmanualer:
Instruktionsmanual til viralt DNA&RNA-isoleringskit
