QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Kitbeskrivelse:
◮Det unikke PCR-optimeringssystem gør 2×QuickEasyTMÆgte PCR Mix-Taqman mere kompatibel.
◮Hot-start Foregene HS Taq Polymerase har højere amplifikationseffektivitet, højere amplifikationsfølsomhed og højere amplifikationsspecificitet.
◮2× QuickEasyTMReal PCR Mix -Taqman bruger et unikt system optimeret af Foregene til at forbedre sensitiviteten og specificiteten af sekvensspecifik probe-detektion, som kan bruges til genotypebestemmelse og bestemmelse af kopitalvariationer og opnå nøjagtige resultater.
◮Dette produkt leveres med ROX intern referencefarve, som kan bruges til at eliminere signalbaggrund og signalfejl mellem brønde, hvilket er praktisk for kunder at bruge i forskellige typer kvantitative PCR-instrumenter.
Beskrivelser
2× QuickEasyTMÆgte PCR Mix-Taqman leveret af QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit er en ny generation af master mix system designet til Real Time PCR amplifikationsreaktion ved brug af specifikke fluorescerende prober.Dens kerne Foregene HS Taq DNA-polymerase er baseret på antistofmodifikation, brugt i forbindelse med Foregene yderligere optimeret PCR-system, har højere specificitet og amplifikationseffektivitet.Sammenlignet med almindelig PCR-blanding har den stærkere amplifikationsevne og lavere mismatch rate.Det kan bruges i fluorescens kvantitativ PCR-reaktion for at reducere ikke-specifik amplifikation og forbedre nøjagtigheden af PCR.Det kan i høj grad forbedre produktspecificitet og reaktionsfølsomhed.Samtidig blev ROX leveret som et internt referencefarvestof.
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit har et bredt anvendelsesområde til mængden af skabelon og kan opnå en god standardkurve i forskellige kvantitative regioner og kan nøjagtigt kvantificere og detektere målgener med god repeterbarhed og høj sikkerhed.
specifikationer
200 forberedelser,500 forberedelser,1000 forberedelser,2000 Forberedelser
Sættets komponenter
| QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman(20μlsystem) | ||||
| Sættets indhold | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
| 200 forberedelser | 500 forberedelser | 1000 forberedelser | 2000 Forberedelser | |
| 2×HurtigtLetTM Ægte PCR Blande-Taqman | 1 ml×2 | 1,7 ml×3 | 1,7 ml×6 | 1,7 ml×12 |
| 20×ROX referencefarve | 200μL | 0,5 ml | 1 ml | 1 ml×2 |
| DNase-fri ddH2O | 1,7 ml | 1,7 ml×2 | 10 ml | 20 ml |
| HVIS DU | 1stykke | 1stykke | 1stykke | 1stykke |
Egenskaber og fordele
■ Det unikke PCR-optimeringssystem gør 2×QuickEasyTMÆgte PCR Mix-Taqman mere kompatibel.
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase har højere amplifikationseffektivitet, højere amplifikationsfølsomhed og højere amplifikationsspecificitet.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman bruger et unikt system optimeret af Foregene til at forbedre sensitiviteten og specificiteten af sekvensspecifik probe-detektion, som kan bruges til genotypebestemmelse og bestemmelse af kopitalvariationer og opnå nøjagtige resultater.
■ Dette produkt leveres med ROX intern referencefarve, som kan bruges til at eliminere signalbaggrund og signalfejl mellem brønde, hvilket er praktisk for kunder at bruge i forskellige typer kvantitative PCR-instrumenter.
Kit ansøgning
■ Fluorescens kvantitativ PCR til skabelon kvantitativ analyse;
■ Ckonventionel PCR-amplifikation;
■ Kan bruges til allelpåvisning.
Opbevaring og holdbarhed
Sættet skal opbevares ved -20°C i mørke;hvis det bruges ofte, kan det også opbevares ved 4°C i en kort periode (brug op inden for 10 dage).
Real Time PCR primer design principper
Forward Primer og Reverse Primer
For Real Time PCR er primerdesign meget vigtigt.Primere er relateret til specificiteten og effektiviteten af PCR-amplifikation og kan designes med henvisning til følgende principper:
Primerlængde: 18-30bp.
GC indhold: 40-60%.
Tm-værdi: Primer-designsoftware, såsom Primer 5, kan give primerens Tm-værdi.Tm-værdierne for opstrøms- og nedstrømsprimerne skal være så tæt som muligt.Tm-beregningsformlen kan også bruges: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Ved udførelse af PCR vælges generelt en temperatur under primerens Tm-værdi på 5 °C som annealingstemperatur (den tilsvarende stigning i annealingstemperaturen kan øge specificiteten af PCR-reaktionen).
Primere og PCR-produkter:
Designprimer PCR-amplifikationsproduktlængden er fortrinsvis 100-150 bp.
Designprimere i skabelonens sekundære strukturelle område bør undgås så meget som muligt.
Undgå dannelsen af 2 eller flere komplementære baser mellem 3'-enderne af opstrøms- og nedstrømsprimere.
Primer 3′ terminal base kan ikke være til stede med 3 yderligere på hinanden følgende G eller C.
Primerne i sig selv kan ikke have komplementære strukturer, ellers vil der blive dannet en hårnålestruktur, som påvirker PCR-amplifikation.
ATCG bør fordeles så jævnt som muligt i primersekvensen, og den 3′ terminale base bør undgås som T.
Appendiks 1：Cell Direct RT-qPCR Kit komponenttilskudspakke
1.Cellelyseopløsning
|
| |||
| Sættets komponenter (24-brønds lysesystem/brønd) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
| 100 T | 500 T | ||
| En deljeg | Buffer CL | 20 ml | 100 ml |
| Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
| Buffer ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
| En delII | DNA viskelæder | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT Mix
|
| |
| Sættets komponenter (20 μl reaktionssystem) | DRT-01011-B1 |
| 200 T | |
| 5× Direct RT Mix | 800 μl |
| RNase-fri ddH2O | 1,7 ml × 2 |
|
| ||
| Sættets komponenter (20 μl reaktionssystem) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
| 200 T | 1000 T | |
| 2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
| 50× ROX referencefarve | 40 μl | 200 μl |
| RNase-fri ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
