• facebook
  • linkedin
  • Youtube

Hot-start Taq enzym er meget udbredt.Sammenlignet med almindelig DNA-polymerase kan hot-start Taq-enzym effektivt undgå en vis ikke-specifik amplifikation og dannelsen af ​​primerdimere og kan effektivt forbedre succesraten for målgenamplifikation.Især inden for genetisk testning er hot-start Taq-enzym blevet identificeret som en obligatorisk standard i industrien, og almindelig DNA-polymerase bør ikke anvendes.Som det kan ses af ovenstående, er hot-start Taq enzymer meget brugt.På nuværende tidspunkt er der mange mærker af hot-start Taq enzymer på hjemmemarkedet, men der er ikke mange hot-start Taq enzymer med høj kvalitet.Stillet over for så mange hot-start Taq enzymprodukter, hvordan skal vi vælge?

1. Vælg hot-start Taq-enzymet med høj amplifikationseffektivitet

PCR-amplifikationseffektivitet er tæt forbundet med ydeevnen af ​​Taq-enzym.Efter at et godt Taq-enzymreaktionssystem er optimeret, er amplifikationseffektiviteten over 95 %, og amplifikationsområdet for den indledende skabelonmængde er bredt.Tilfredsstillende amplifikation kan opnås, når målgenindholdet er lavt, og det er ikke let at blive forgiftet, når skabelonmængden er høj, og den eksponentielle amplifikationsperiode er lang.For Taq-enzymet med dårlig ydeevne, selvom reaktionssystemet er blevet optimeret mange gange, er amplifikationseffektiviteten stadig mindre end 90%, "S"-formen af ​​amplifikationskurven er ikke tydelig, hældningen er lille, og kurven er flad.Når mængden af ​​skabelon er lav, kan den ikke forstærkes, og når mængden af ​​skabelon er høj, er amplifikationseffekten ikke ideel.Derfor er udvælgelsen af ​​DNA-polymeraser med høj amplifikationseffektivitet afgørende for succesen med PCR og qPCR.

2. Vælg hot-start Taq-enzym med stærk enzymkraft

70f48394

 

Den enzymatiske kraft af Taq-enzymet er relateret til amplifikationseffektiviteten.Generelt gælder det, at jo stærkere den enzymatiske kraft af hot-start Taq-enzymet er, jo længere er den eksponentielle vækstperiode for PCR-amplifikation, jo mere typisk 'S-formet' kurve, jo højere er fluorescenssignalværdien, og jo mere egnet til multipleks PCR-detektion.Brand DNA polymeraser med svag enzymatisk kraft kan generelt kun understøtte 2-plex reaktioner.Når man laver 3-plex reaktioner, er amplifikationskurven lav, fluorescenssignalværdien er lav, og der er ingen typisk amplifikationskurve, så resultaterne er svære at bedømme.

 

3. Vælg et hot-start Taq-enzym med høj følsomhed

 

Generelt set har DNA-polymerase høj amplifikationseffektivitet og høj følsomhed, men der er også uoverensstemmelser.Hvis målgenmængden af ​​prøven, der skal amplificeres, er lav, anbefales det at teste amplifikationsfølsomheden af ​​Taq-enzymet.Den mest almindelige detektionsmetode er at udføre 10- eller 5-fold gradientfortynding af målgenplasmidfragmentet, udføre PCR-detektion ved den lavere fortynding og vælge hot-start Taq-enzymet med højere detektionsfølsomhed.

 

Det fremgår af ovenstående, at forskere skal vælge efter deres egne forsøgskrav og finansieringsbetingelser.Det er bedst at udføre et amplifikationseksperiment med gradientfortynding for at påvise amplifikationseffektiviteten og følsomheden af ​​hot-start Taq-enzymet.

 

Et eksempel på Foregene's Taq DNA-polymerase:

 

Foreasy HS Taq DNA-polymerase

 

Beskrivelse

 

Foreasy HS Taq DNA-polymerase er en DNA-polymerase udtrykt i Escherichia coli-teknologiske bakterier ved genrekombinationsteknologi.Enzymet er kombineret med en unik reaktionsbuffer, som gør produktet meget modstandsdygtigt og kompatibelt, og kan direkte bruge prøvelysatet (Foregene Lysis-systemet) som skabelon til detektionsreaktioner.

15a5e233 2237a171

 

Ansøgning

 

Kvalitativ PCR og kvantitativ PCR-detektion af oprensede templates og ikke-oprensede templates.

 

Kvalitetskontrol

 

1.Ingen eksogen nukleaseaktivitet påvist

 

2.PCR-metode til at påvise resterende genomisk DNA uden vært

 

3. Det kan effektivt amplificere enkeltkopi gener i det humane genom

 

4. Opbevar ved stuetemperatur i en uge, ingen åbenlyse aktivitetsændringer

 

Produktdetaljer: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/


Indlægstid: Jul-07-2022