Lnc-RT Heroᵀᴹ I(Med gDNase)(Super Premix til førstestrengs cDNA-syntese fra lncRNA)
specifikationer
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (Med gDNase) er et revers transkriptionssystem specielt udviklet til lncRNA til hurtigt at fjerne genomisk DNA-kontamination.5×gDNase Mix kan hurtigt fjerne det resterende genom i RNA ved 42°C i 2 minutter, hvilket effektivt undgår interferens af genomet på qPCR-resultater.
5×L-RT HeroTM Mix indeholder Foregene LncRNA Reverse Transcriptase specielt udviklet af Foregene, som er en ny type revers transcriptase specifikt til lncRNA og andre lange RNA komplekse skabeloner, med stærkere RNA-affinitet og højere reversal-registreringseffektivitet.Det optimerede system gør den omvendte transkriptionshastighed hurtigere og kan nemt transskribere RNA-skabeloner med højt GC-indhold og kompleks sekundær struktur.Den første strengs cDNA-syntese kan fuldføres ved 42°C på 15 minutter.
Sættets komponenter
| 5× gDNase-blanding |
| 5× L-RT HeroTM Mix |
| RNase-fri ddH2O |
| Instruktioner |
Egenskaber og fordele
■Effektiv evne til at fjerne gDNA, som kan fjerne gDNA i skabelonen inden for 2 minutter.
■ Det kan effektivt reversere transkription af lncRNA.Når det omvendte transkriptionsprodukt udsættes for qPCR, er Ct-værdien lavere end for et konventionelt omvendt transkriptionssystem.
■ Effektivt omvendt transkriptionssystem, det tager kun 15 minutter at fuldføre syntesen af den første strengs cDNA.
■ Komplekse skabeloner: skabeloner med højt GC-indhold og kompleks sekundær struktur kan også vendes med høj effektivitet.
■ Højfølsomt revers transkriptionssystem, pg-niveau skabeloner kan også få cDNA af høj kvalitet.
■ Det omvendte transkriptionssystem har høj termisk stabilitet, den optimale reaktionstemperatur er 42℃, og den har stadig god omvendt transskriptionsydelse ved 50℃.
Kit ansøgning
lncRNA relativ kvantitativ analyse.
lncRNA absolut kvantitativ analyse.
Det kan hurtigt og præcist analysere spor-RNA såsom RNA-virus.
Omvendt transkription af RNA-skabeloner med højt GC-indhold eller kompleks sekundær struktur.
Workflow
Opbevaring og holdbarhed
Sættet skal opbevares ved -20°C. Opbevar produktet i et køleskab med konstant temperatur ved -20°C umiddelbart efter modtagelsen.Hvis opbevaringsbetingelserne er passende, vil produktet ikke forringe ydeevnen i løbet af den 1-årige gyldighedsperiode.
Vejledning til problemanalyse
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-specifik forstærkning
1. Urimeligt primerdesign
Anbefaling: Design primere efter primer design principper.
2. Genomrester.
Forslag: Sørg for, at det første trin i reaktionstemperaturen for gDNA-fjernelse er 42°C, og reaktionstiden kan også forlænges til 5 min.
Intet forstærkningssignal ved RT-qPCR
1. RNA nedbrydes.
Anbefaling: Materialet til RNA-ekstraktion bør være så frisk som muligt, og RNA af høj kvalitet og høj renhed bør anvendes.
2. RNA indeholder hæmmere.
Anbefaling: Revers transkriptionshæmmere omfatter generelt SDS, guanidinsalte, EDTA osv. Det anbefales at vaske RNA-præcipitatet med 70 % ethanol for at fjerne inhibitorerne.
3. Primer design spørgsmål.
Anbefaling: I henhold til primerdesignprincippet skal primerne omdesignes til inspektion.
Målbåndet vises i den tomme kontrol
1. Forurening af driftsværktøj eller reagenser.
Anbefaling: Alle reagenser eller udstyr til eksperimentet bør autoklaveres.Vær forsigtig og skånsom ved håndtering for at forhindre, at DNA-prøver bliver suget ind i pipetten eller spildt ud af centrifugerøret.
2. Kontaminering fandt sted under fremstillingen af PCR-reaktionssystemet.
Anbefaling: Tag de nødvendige forholdsregler ved håndtering, såsom: at bære latexhandsker, bruge filterspidser.Brug Real Time PCR Mix i et kontamineringssikkert system.
3. Primerne nedbrydes.
Forslag: Brug SDS-PAGE-elektroforese til at detektere, om primerne er nedbrudt, og udskift med nye primere til fluorescensdetektionsforsøg.
Instruktionsmanual:
